当我们拿到测序结果后，随之而来三连疑问？

QS和CRL是什么鬼？“.ab1”和“.seq”文件谁才是真正的王者？嫉妒别人完美测序结果的柠檬精是不是只有我一个？

何必因为不会分析Sanger测序结果而烦恼？今天，我们来为大家介绍一下几种常见的测序结果特点及解决方案。

首先，我们来了解几个简单的概念

QV：碱基的质量值(Quality Value，QV)用于量化评估该碱基的可信度，由序列分析程序根据该碱基的峰形计算得出。QV值越高，误差率越低。

QS：测序结果的序列质量得分(Quality Score, QS)是序列中所有碱基质量值(Quality Value)的平均值，用于判断测序结果整体的可信度。

CRL：序列连续读长(Contiguous Read Length，CRL)。即整个序列中，各个碱基质量值均大于20(可信度大于99%)的片段里，最长片段的长度。


针对常规质粒样品，通常以QS和CRL值作为判定测序结果是否成功的参考。



下面我们介绍一下常见的几种测序结果的峰图

1. 正常峰图特征描述：峰形比较完整，基本为单一峰形

2.无信号峰图特征描述：序列峰图杂乱无章，测序干扰较大，没有明显主峰

3.衰减峰图特征描述：起始峰图良好，逐渐出现底峰干扰主峰读值

4.中断峰图特征描述：序列中含有特殊结构或因GC含量高导致测序中断——中断峰图实例

5.套峰峰图特征描述：测序峰图为非单一峰型，称之为套峰

6. 弥散峰图特征描述：峰形过宽，无法准确读值

7. Poly结构或重复序列峰图特征描述：序列中含有Poly结构导致非特异套峰或中断

◆ Poly A结构导致此区域后面产生非特异性套峰

◆ GT重复序列导致此区域后面产生非特异性套峰

Poly结构或重复序列峰图实例