慢病毒


慢病毒载体(Lentiviral vector)作为基因递送系统的关键工具,凭借其高效的基因组整合能力、广谱宿主细胞感染特性及转基因长效稳定表达优势,已成为现代生物医学研究的重要技术平台。该载体系统在基础研究领域(如基因功能解析与调控网络研究)及转化医学领域(包括免疫细胞工程化改造、CRISPR基因编辑系统靶向递送、单基因遗传病基因补偿治疗等)展现出显著的应用价值。

为应对复杂研究场景对病毒载体性能的持续升级需求,安升达科研服务体系开发了专业化的慢病毒包装解决方案。通过多年持续技术研发,本平台针对较长外源片段的病毒包装和难感染细胞类型的病毒包装,均有较好的技术突破。

安升达慢病毒载体生产采用的是行业公认的标准流程,结合了第二代和第三代慢病毒系统的优势,既能保证生物安全性,又能得到高滴度病毒。安升达生产的慢病毒载体,经过严格的质量检测(支原体检测、无菌检测和滴度检测),可满足客户开展细胞和动物体内实验的需求。


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慢病毒产品种类

服务类型 纯度 滴度 特点
常规慢病毒包装 高纯度病毒和普通纯度 1.0E+08 TU/ml 高效感染多种细胞类型
高效感染免疫细胞慢病毒 IC enhancer 高纯度病毒 1.0E+08 TU/ml 高效感染免疫细胞
核酸假病毒包装 高纯度病毒 1.0E+09 copies/ml 质粒残留小于1%
定制化病毒包装 如定制化包膜病毒等
文库病毒包装 高纯度病毒 1.0E+08 TU/ml 文库大小无限制,均一性<8,覆盖度>99%

慢病毒优势

安全性好-复制缺陷型病毒不会造成二次感染,使用较为安全
稳定高效表达-可将目的基因整合到宿主细胞的基因组,实现持续稳定高效的表达
免疫原性低-不易诱发宿主免疫反应,适用于动物实验
可感染多种类型细胞-可感染分裂和非分裂细胞,对原代细胞、干细胞和神经细胞等较难转染的细胞有较高的感染效率
片段容量大-可携带长度接近4 kb较大片段
病毒滴度高、总量大-病毒滴度可达到1.0E+08~1.0E+09 TU/mL

慢病毒质粒骨架

载体信息表
载体类型(筛选标记) 载体名称 质粒元件 质粒图谱
过表达载体(抗性+荧光) pGLV05 pLent-EF1a-MCS-CMV-GFP-P2A-Puro 图片
pGLV06 pLent-EF1a-MCS-CMV-GFP-P2A-HygR 图片
pGLV07 pLent-EF1a-MCS-CMV-mCherry-P2A-Puro 图片
pGLV08 pLent-EF1a-MCS-CMV-mCherry-P2A-BSD 图片
pGLV09 pLent-EF1a-MCS-CMV-BFP-P2A-G418 图片
pGLV10 pLent-EF1a-MCS-CMV-Fluc-P2A-G418 图片
pGLV11 pLent-EF1a-Fluc-CMV-Puro 图片
pGLV12 pLent-EF1a-Fluc-CMV-GFP-P2A-Puro 图片
pGLV13 pLent-EF1a-MCS-GFP-P2A-G418 图片
pGLV14 pLent-EF1a-MCS-P2A-GFP-CMV-Puro 图片
过表达载体(抗性) pGLV16 pLent-EF1a-MCS-CMV-Puro 图片
pGLV17 pLent-EF1a-MCS-CMV-G418 图片
pGLV18 pLent-EF1a-MCS-CMV-HygR 图片
pGLV19 pLent-EF1a-MCS-CMV-BSD 图片
过表达载体(荧光) pGLV23 pLent-EF1a-MCS-CMV-GFP 图片
pGLV24 pLent-EF1a-MCS-CMV-mCherry 图片
pGLV25 pLent-EF1a-MCS-CMV-Fluc 图片
过表达载体(无筛选标记) pGLV32 pLent-EF1a-MCS 图片
shRNA敲降载体(抗性+荧光,抗性,荧光) pGLV33 pLent-U6-CMV-GFP-P2A-Puro 图片
pGLV34 pLent-U6-CMV-mCherry-P2A-Puro 图片
pGLV35 pLent-U6-CMV-Puro 图片
pGLV36 pLent-U6-CMV-GFP 图片
pGLV37 pLent-U6-CMV-mCherry-BFP-P2A-BSD 图片
pGLV38 pLent-U6-CMV-BFP-P2A-BSD 图片
sgRNA敲除(KO)慢病毒载体 LentiCRISPR v2 LentiCRISPR v2 图片
LentiCRISPR v2-BSD LentiCRISPR v2-BSD 图片
LentiCRISPR v2-HygR LentiCRISPR v2-HygR 图片
LentiCRISPR v2-GFP LentiCRISPR v2-GFP 图片
LentiCRISPRV2-mCherry LentiCRISPRV2-mCherry 图片
LentiCRISPRV2-GFP-Puro LentiCRISPRV2-GFP-Puro 图片
LentiCRISPRV2-mCherry-BSD LentiCRISPRV2-mCherry-BSD 图片
LentiCRISPRV2-mCherry-Puro LentiCRISPRV2-mCherry-Puro 图片
RNA假病毒表达质粒 pGLV39 pLent-MCS-mCherry-Puro 图片
       

注1:载体按照订购频次进行先后排序,如需其他类型质粒,请咨询;
注2:MCS为多克隆位点缩写;
注3:如需其他类型质粒,可单独定制;
本公司拥有Broad研究所CRISPR专利授权,相关质粒使用需要收取费用,详情可来询

 

案例展示

NK-92细胞系慢病毒感染

使用安升达高纯GFP慢病毒感染NK92细胞,流式检测GFP阳性群比例,结果显示,MOI=50条件下,感染效率可以达到70%以上。

lentiviral_case_1

GFP慢病毒感染NK92细胞,流式检测结果

原代T细胞慢病毒感染

使用安升达高纯GFP慢病毒感染经PBMC纯化的原代T细胞,流式检测CD3+活细胞群中GFP阳性细胞群比例,结果显示,MOI=10条件下,感染效率可以达到60%以上,MOI=200条件下,感染效率可以达到70%以上。

lentiviral_case_2

GFP慢病毒感染原代T细胞,流式检测结果

原代B细胞慢病毒感染

使用安升达高纯GFP慢病毒感染经PBMC纯化的原代B细胞,流式检测CD19+/CD20+活细胞群中GFP阳性细胞群比例,结果显示,MOI=200条件下,感染效率可以达到50%以上。

lentiviral_case_3

GFP慢病毒感染原代B细胞,流式检测结果

慢病毒项目经验

lentiviral_case_4

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